继上一篇应用案例“毛细管凝胶电泳CGE-UV用于分析核酸样品”后，上海通微分析技术有限公司持续推进毛细管电泳在生命科学方向的应用。核酸样品测试参考《美国药典》mRNA疫苗的质量分析方法，通过自制PVP-K90凝胶进行了DNA Marker的测试，自制PEG-35000凝胶进行了小核酸的测试。
近期的蛋白、抗体测试中，分别参考参照《欧洲药典》11.0中抑肽酶的毛细管电泳分析方法和《中国药典》中去丙氨酸-去甘氨酸-抑肽酶和去丙氨酸-抑肽酶的毛细管电泳分析方法，实现了抑肽酶和杂质分离度达到1.4的效果，客户样品杂质含量均在药典要求的杂质含量以下。
本案例采用十二烷基硫酸钠毛细管电泳（CE-SDS）紫外检测方法，Protein Ladder (10-200kD)的14种混合蛋白marker在SDS条件下变性，并与SDS结合形成带负电的蛋白质-SDS复合物。这些复合物在电场作用下沿毛细管迁移，根据分子量大小进行分离。分离后的蛋白质可以通过紫外光检测器进行检测和定量。按照《中国药典》毛细管电泳法（通则0542），本应用采用NovoBio的CE-SDS凝胶实现了蛋白Marker的有效分离，为蛋白的定性、定量提供了一定的参考依据。
1）变性非还原性蛋白上样缓冲液(1X)的测定
图 1. 1X loading buffer的毛细管凝胶电泳紫外吸收图
2）10kD蛋白标溶于1X变性非还原性蛋白上样缓冲液测试，确定内标出峰位置
图2. 10kD蛋白内标的毛细管凝胶电泳紫外吸收图
3）10-200kD蛋白Marker的毛细管凝胶电泳分析
图3. 10kD蛋白内标的毛细管凝胶电泳紫外吸收图
峰列表
4）毛细管凝胶电泳场强缩小一倍的10-200kD蛋白Marker分析测试
图4. 10kD蛋白内标的毛细管凝胶电泳紫外吸收图（缩小一倍场强）
使用通微CE-1000毛细管电泳系统，配备紫外检测器和液冷柱温箱，搭配使用NovoBio市售CE凝胶可以高效分离10-200kD蛋白Marker中的14种蛋白标品。可以将实验室传统的SDS-Page测试可以转移到毛细管电泳上，该方法精确、灵敏度高，能满足生物实验室蛋白、多肽、抗体的日常分析检测要求。
| 推荐仪器配置 |
CE-1000毛细管电泳系统 |
| TriSep® –3000毛细管液冷柱温箱 |
| TS-1 毛细管烧结器 |
| Unimicro ChromStation 色谱工作站 |